隨著疫情的升溫，每天下午公布的確診人數也是全國人最關注的焦點。然而最近因為檢驗量大增，醫檢師和儀器無法在一天跑完所有檢體，造成時常有「校正回歸」情形發生。這也讓許多人不諒解，懷疑「篩檢為何那麼慢？」。
然而「檢驗流程」並不像我們想像的那麼簡單！近期就有位在長庚醫院任職的醫檢師助理張郎，在自己的臉書上發文公開核酸檢測（PCR）的詳細程序，居然多達20幾個繁瑣流程、驗一個要按288次、甚至得在0.3公分的小孔洞中尋找病毒！做完一個，手指也被手套中的水氣泡爛了，只盼酸民能尊重專業、多多鼓勵、不要再裝懂說風涼話。
貼文也引起近2萬名網友按讚轉發，紛紛留言表示敬佩，「原來不是放進機器就好...」、「我懂為什麼快不起來了」，一起來看看吧！
#篩檢不是「放進儀器就好」
大家平時去一趟檢測站、等一到兩天就出來的檢驗報告，背後的檢驗過程其實非常繁瑣且複雜！不僅要耗費腦力之外，更要靠眼力以及手力，慢慢從中找出病毒。
圖片來源：臉書張郎（Loe Chang）授權
「從病人身上找到呼吸道病毒的基因體有多難呢？說穿了也不是很難 ，比驗孕稍微難一點而已」
張姓醫檢助理分享，從鼻腔取出檢體後，要先加入化學物質將組織分解，手工搖勻成乳糜狀之後離心，讓檢體呈現三層分離。繼續抽取、離心、靜置之後會得到沉澱物RNA樣本，但這個RNA樣本含有許多雜質，包含環境細菌、病人身體中的、病毒的、死掉的細胞。
為了分離掉各種雜質，隨後要繼續「加入化學物質、搖勻、靜置、抽取需要的成分、回溶、風乾、染色」等，不斷重複上述步驟無數次，直到找到最重要的「Ct值（cDNA被酵素放大的次數）」數據為止。每個步驟都要謹慎，不能抽取到其他雜質，手一抖就可能前功盡棄。
＃「為何找新病毒株這麼慢？」
圖片來源：臉書張郎（Loe Chang）授權
他解釋，分離病毒株需要藉由許多分層離心的梯度，分出來的每一個濃度梯度都可以做一次樣品的採樣。「檢驗人員的大拇指加一次樣品要按96次」，「一個樣品有三種東西，總共要按288次」」。一整天下來拇指不斷按壓，就算沒抽筋也十分痠痛。
接著要將病毒樣品放在在約0.3cm的銅網上，烘乾一天。如果病毒太小就得做染色。再以電子顯微鏡，在銅網中的300個洞中找到病毒。知道敵人是誰後，再進行蛋白質晶體繞射，找到推測的蛋白質結構、進行基因定序，最終，才能判斷「這是什麼」。
＃大家以為沒什麼，背後的辛苦卻無人知！
圖片來源：臉書張郎（Loe Chang）授權
醫檢師助理張郎最後也表示，「如果你看完了，謝謝你，因為你知道為什麼這麼慢了，沒看完沒關係，因為你永遠不會懂我們多無奈」，做完一系列的步驟之後，手套戴了整個下午，因為長時間水氣都悶在裡面，幾乎就要「泡爛」！但好不容易做完一輪以為能休息時，並沒有！背後還有成千上百個需要他們繼續採檢，一天得重複上面動作超過10次。回到家看著電視，卻聽見許多人的責怪他們驗太慢，這讓他們難免灰心。
如果看不懂沒關係，他表示「那請你乖乖在家，除了別亂跑，記得給我們一點鼓勵，不要以為你都懂，其實你知道的真的比你想像的還少」。
看完上面醫檢助理的分享，不少網友都表示非常敬佩。不要外出趴趴走就是最好的幫助！看到為了我們而守護在前線的醫護人員，每天辛苦暴露在高風險的環境下，請一定要給他們一個鼓勵！
最後我們來看看他分享的詳細流程吧，小編看完真心跪了，專業無價，我們一起獻上尊敬！
＃鼻腔採檢完後的20個步驟
1. 加入Trizol reagent把組織分解後，以1/5的比例加入chloroform
2. 搖勻呈現乳糜狀後，13500g攝氏4度離心15分鐘後，呈現三層分離
3. 最後非常仔細小心地取出上層透明的部分
4. 再加入等體積的isopropanol
5. 搖勻後，攝氏4度靜置五分鐘
6. 13500g離心十分鐘
7. 得到沉澱物即為total RNA 樣本（包括環境細菌的、你身體的、病毒的以及死細胞的）
8. 為了去除殘留的isopropanol,chloroform，需加入75%乙醇（in DEPC-double_Distilled water , ddH2O)）
9. 並搖晃使沈澱物飄起
10. 再以13500g攝氏4度，離心五分鐘（重複上述步驟兩次）
11. 最後風乾後以DEPC-ddH2O回溶
12. 最後在nano-drop測定RNA concentration （一個sample大概五十分鐘，當sample量變成16個時，會變成1.5小時）
大家看到這邊是不是已經進入到異次元世界了！但是接下來的步驟又更關鍵，一定得小心翼翼耐著性子做！
圖片來源：臉書張郎（Loe Chang）授權
13. 由於RNA樣本是各種奇怪RNA，又怕殘留DNA，所以必須事先加入 DNase-I，去除DNA
14. 並為了避免RNA損壞，要額外加入RNase inhibitors
15. 隨後將RNA以反轉錄的方式，變成互補DNA（complementary DNA）
16. 約需要200 ng~1000ng的總RNA
17. 歷經一個小時的Reverse transcriptase PCR的努力，將RNA全部變成cDNA，再將cDNA稀釋成5~15 ng/ul（你沒看錯～就是千分之一毫升）
18. 最後把cDNA樣品放入第一張圖的白盤中，白盤在共有96格（約12*8公分）
19. 接著與病毒基因體的引子（primer）與SYBR-green（螢光探針-聚合酶複合物）混合，總體積約10～20 ul ，所以他的滴管也非常的小（如第二張圖）
20. 之後需要1.5小時的時間 進行35～40重複的PCR program
圖片來源：臉書張郎（Loe Chang）授權
21. 將病毒樣品放在約0.3cm的銅網上烘乾一天，就是中間那顆小水滴（如上上圖）
22. 如果病毒太小就得用UA（Uranyl Acetate）做染色
23. 之後以穿透式電子顯微鏡在銅網中的300個洞中找到病毒
24. 知道敵人是誰後，再進行蛋白質晶體繞射，找到推測的蛋白質結構，進行基因定序
25. 確認結果
圖片來源：臉書張郎（Loe Chang）授權
本文感謝 張郎（Loe Chang） 授權
